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美鳳力臨床前大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心
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在病理實(shí)驗(yàn)中，對(duì)不同部位的組織進(jìn)行取材是實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的首要步驟，也是獲取有效數(shù)據(jù)的關(guān)鍵。接下來(lái)，我們將詳細(xì)了解病理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取材的步驟及注意事項(xiàng)。
所需的試劑有：麻醉劑、固定液和生理鹽水。 廢物存放要求：應(yīng)使用有明顯標(biāo)志的黃色垃圾袋來(lái)存放動(dòng)物尸體和廢棄臟器，銳器盒則用于存放廢棄的針頭、刀片和注射器等。 動(dòng)物麻醉及處死過(guò)程應(yīng)迅速進(jìn)行，這既符合動(dòng)物倫理要求，也能避免動(dòng)物組織死后自溶，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 在取材時(shí)，應(yīng)對(duì)動(dòng)物模型的外表和臟器進(jìn)行肉眼觀察，并做相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)記錄。 取材人員應(yīng)對(duì)所取樣本有充分了解，取材過(guò)程要迅速。對(duì)于易自溶的組織，如腸道和腺體，應(yīng)優(yōu)先處理。 取材時(shí)使用的剪刀和刀片應(yīng)保持鋒利，鑷子盡量避免使用齒鑷，夾取臟器時(shí)應(yīng)用無(wú)齒鑷夾住其周?chē)慕Y(jié)締組織。 如無(wú)特殊要求，所選組織應(yīng)盡量包含臟器的全部層次或重要結(jié)構(gòu)。若相同器官需要多次取材，選材部位應(yīng)盡量保持一致。 剖檢應(yīng)在設(shè)有解剖臺(tái)的解剖室內(nèi)進(jìn)行，小動(dòng)物可在大小適宜的搪瓷盤(pán)內(nèi)進(jìn)行。剖檢完成后，應(yīng)及時(shí)對(duì)用具和場(chǎng)地進(jìn)行嚴(yán)格消毒，特別是處理死于傳染病的動(dòng)物尸體時(shí)，要嚴(yán)防病原擴(kuò)散。 動(dòng)物尸體應(yīng)及時(shí)收入冰柜，并按照醫(yī)療垃圾的處理方法進(jìn)行妥善處理。 *注：動(dòng)物尸檢時(shí)，常被忽視的體表檢查也非常重要。例如，四肢水腫可能提示動(dòng)物生前患有心臟、肝臟、腎臟或關(guān)節(jié)炎癥等疾?。晃舶蛪乃揽赡苁峭鈧ㄈ鐘A傷、打斗等）或注射時(shí)損傷血管導(dǎo)致血液供應(yīng)不足造成的；天然孔如口腔、鼻孔周?chē)醒?，可能是食道或上呼吸道損傷；肛門(mén)周?chē)鄯x則可能提示動(dòng)物生前有腹瀉現(xiàn)象，多患有腸道疾病等。 1. 若發(fā)現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的病變，應(yīng)認(rèn)真觀察并準(zhǔn)確選取病變部位的組織，切勿漏取，以確保全面反映組織病變的全貌。同時(shí)，需要由表及里地觀察病變狀況，測(cè)量重量、記錄部位和體重等。 2. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法、目的以及病變情況，應(yīng)盡量多取材，并確保所選取的組織材料包含各臟器的主要結(jié)構(gòu)部分。 3. 應(yīng)避免選取因解剖失誤造成的凝血塊和壞死組織等。 4. 在取病理材料時(shí)，應(yīng)避免壓擠（以免組織變形）、刮抹（以免組織缺損）和沖洗（以免紅細(xì)胞和其他細(xì)胞吸水腫脹破裂）。 5. 所取的材料應(yīng)盡量保持肉眼標(biāo)本的完整性，厚度不宜過(guò)厚或過(guò)薄。建議選用1.5cm×1.5cm×0.5cm的取材規(guī)格。 6. 在組織分離時(shí)，應(yīng)注意鈍性分離，避免用器械直接夾傷組織。如果臟器上附有血液、黏液等污物，應(yīng)用生理鹽水沖洗后再進(jìn)行固定。如果血液過(guò)多導(dǎo)致固定液變色，應(yīng)及時(shí)更換固定液。 7. 胃腸標(biāo)本在取材前應(yīng)將內(nèi)容物沖洗干凈。 8. 對(duì)于肝腎等較大的臟器，可以先將其切成較薄的塊狀組織進(jìn)行固定，或者稍固定后再切成片狀繼續(xù)固定。 9. 對(duì)于垂體、腎上腺、甲狀腺等小組織，應(yīng)平鋪于濾紙上再進(jìn)行固定。 1）常規(guī)HE染色時(shí)，切片厚度應(yīng)根據(jù)不同組織類(lèi)型進(jìn)行調(diào)整。 2）在光鏡下觀察時(shí)，應(yīng)首先區(qū)分有無(wú)特異性病變及其范圍，然后由臟器的一端向另一端進(jìn)行整體觀察和描述。 3）觀察小動(dòng)物臟器時(shí)，應(yīng)注意有無(wú)腫大、增生等現(xiàn)象。可以使用10倍鏡由一端開(kāi)始計(jì)數(shù)該臟器包含的10倍鏡鏡頭視野數(shù)，或計(jì)數(shù)整個(gè)切片中的功能單位數(shù)。 4）對(duì)于大動(dòng)物的臟器，如果懷疑有腫大、增生等情況，可以使用40倍鏡頭計(jì)數(shù)每一視野中的細(xì)胞或功能單位數(shù)。 5）在確定病灶大小后，應(yīng)使用40倍鏡頭進(jìn)行觀察?？梢韵葘㈢R頭的圓周與觀察的病灶邊緣相切，再觀察該病灶在這一視野中的比例。 6）在計(jì)算實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腫瘤發(fā)生率時(shí)，不論腫瘤是良性還是惡性，均應(yīng)計(jì)入腫瘤發(fā)生數(shù)，并計(jì)算腫瘤發(fā)生率。
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