Transwell小室底層有一張通透性的膜(一般為聚碳酸酯膜),將其放置于孔板中,小室內(nèi)稱上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱下室。由于聚碳酸酯膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細胞。應(yīng)用Transwell可研究下層培養(yǎng)液中的成分對上室細胞生長、運動等的影響。
1.細胞共培養(yǎng):
1)下室中接種能夠分泌細胞因子或特定蛋白產(chǎn)物的細胞,在上室中接種效應(yīng)細胞;
2) 按照實驗設(shè)計培養(yǎng)一定時間;
3) 檢測效應(yīng)細胞的活力改變,亦可使用流式細胞儀檢測細胞凋亡率,WB檢測細胞表面分子及凋亡相關(guān)分子的表達。
2.趨化實驗:
1) 在上室中接種相應(yīng)細胞,下室中接種能分泌細胞因子的細胞或加入特定細胞因子的培養(yǎng)基;
2)計數(shù)進入下室的細胞,以反應(yīng)分泌產(chǎn)物或特定因子對細胞的趨化作用。
3.腫瘤細胞遷移實驗
1)在上室接種效應(yīng)細胞,下室中加入待測樣品(化合物、提取物或混合物等);
2)計數(shù)進入下室的細胞量,可評價待測樣品對腫瘤細胞遷移的影響。
