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美鳳力臨床前大動物實驗中心
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在動物實驗中, 有效的麻醉不僅是保證實驗順利進行方法學上的關鍵環(huán)節(jié), 也是保證實驗動物福利的一項基本要求。
如何根據(jù)科研目的采用合適的實驗動物并選擇恰當?shù)穆樽硭幬锸琼樌M行動物實驗的重要前提。理想的麻醉應該既要保證實驗操作順利進行, 保證獲得的實驗數(shù)據(jù)準確可靠, 又要將實驗動物遭受的痛苦降至最低, 保證動物福利要求。
根據(jù)麻醉范圍主要分為全身麻醉和局部麻醉，全身麻醉又分為吸入麻醉和非吸入麻醉。
1. 全身麻醉：實驗動物一般較難合作，因此，實驗中常采用全身麻醉。
吸入麻醉：又稱為氣麻，將揮發(fā)性或氣體麻醉劑，由動物呼吸道吸入體內而產生麻醉效果。
非吸入麻醉：即注射麻醉，包括肌肉、腹腔、靜脈注射。
2. 局部麻醉：指通過麻醉藥阻斷機體某一部分的感覺神經(jīng)傳導功能，而運動神經(jīng)傳導保持完好或同時有程度不等的被阻滯狀態(tài)。
吸入式麻醉
麻醉藥以蒸氣或氣體狀態(tài)經(jīng)呼吸道吸入而產生麻醉者，稱吸入麻醉。吸入法對多數(shù)動物有良好的麻醉效果，其優(yōu)點是易于調節(jié)麻醉的深度和較快的終止麻醉，缺點是中、小型動物較適用，對大型動物如狗的吸入麻醉操作復雜，通常不用。
常用的吸入性麻醉劑有：異氟醚 Isoflurane、七氟烷 Sevoflurane、氟烷 Halothane
注射式麻醉
注射麻醉是使用非揮發(fā)性全身麻醉藥進行麻醉的方法。大小鼠實驗中常用苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉、水合氯醛和氯胺酮等麻醉劑，這些麻醉劑使用方便，一次給藥可維持較長的麻醉時間，麻醉過程較平衡，動物無明顯掙扎現(xiàn)象，但缺點是蘇醒較慢。
一般采用靜脈注射、腹腔注射、肌內注射等方法進行麻醉。兔、貓、犬、豬等大動物常采用靜脈注射、肌內注射的方法進行麻醉；小鼠、大鼠、豚鼠等小動物常采用腹腔注射（注射部位宜選在腹部后1/3處略靠外側，避開肝和膀胱）的方法。
注意事項：
（1）靜脈注射必須緩慢，同時觀察肌肉緊張性、角膜反射和對皮膚夾捏的反應，當這些活動明顯減弱或消失時，立即停止注射。配制的藥液濃度要適中，不可過高，以免麻醉過急；但也不能過低，以減少注入溶液的體積。
（2）在使用麻醉藥過程中，隨時注意觀察動物的反應，尤其是采用靜脈注射時，絕不可將按體重計算出的用量匆忙進行注射。
（3）腹腔注射最主要的就是要針頭進入動物腹腔后，一定要注意回抽，否則極易將麻藥打到動物的胃腸道，引起胃腸道麻痹脹氣，動物常因此無法進入麻醉狀態(tài)，甚至死亡。
靜脈注射一般采用鼠尾靜脈或兔耳緣靜脈注射。正確找到注射的靜脈是很關鍵的。其次就是，當采用體重計算麻藥用量后，切不可匆忙注射，靜脈注射必須緩慢進行，一定要邊注射邊觀察動物的反應，如肌肉緊張度、角膜反應、抓捏反應等。
小鼠麻醉后務必進行麻醉深度的確認。若麻醉深度不夠則須延后實驗，.待達到麻醉深度后再進行實驗;或者考慮增加劑量使其達到麻醉深度。
麻醉由淺入深一般可以分為4個階段：
誘導期：仍有主動動作，呼吸與心率增加，運動時步態(tài)不穩(wěn)、后半身搖晃，后肢無力。
淺外科期：停止運動后呈側臥狀，置于仰臥后不能翻正。對非疼痛刺激物肢體動作反應，捏夾皮膚或刺激腳趾仍有收縮反射，呼吸規(guī)則以胸式呼吸為主，出現(xiàn)中等程度的肌肉松弛，眼瞼和角膜反射存在。
深外科期：呼吸頻率下降，呼吸規(guī)則以腹式呼吸為主，肌肉完全松弛，眼瞼反射消失、角膜反射微弱，對嚴重刺激都不引起有害反射。
脫離深外科期：四肢持續(xù)震顫、抽搐，全身肌肉開始收縮，由平坦仰臥狀轉為側臥蜷縮狀。
簡單確認麻醉深度的方式：
皮膚捏夾反應：用有齒鑷捏夾小鼠皮膚
刺激腳趾反應：刺激小鼠腳趾或腳掌部位。
觀察小鼠是否有反應，若小鼠反應靈敏則說明麻醉過淺
局部麻醉
局部麻醉是用局部麻醉藥阻滯周圍神經(jīng)末梢或神經(jīng)干、神經(jīng)節(jié)、神經(jīng)叢的沖動傳導，產生局限性麻醉區(qū)。局部麻醉的特點是動物可保持清醒狀態(tài)，對重要器官功能干擾輕微，麻醉并發(fā)癥少，是一種比較安全的麻醉方法。
目前常用的局部麻醉劑有普魯卡因、利多卡因和丁卡因。
如下為這三類的比較：
局部麻醉常用的方法是表面麻醉、浸潤麻醉、區(qū)域阻滯麻醉及傳導麻醉等。
表面麻醉：將穿透力強的局部麻醉藥直接作用于黏膜表面，使黏膜下神經(jīng)末梢麻醉?？蓪⑺幬锱涑刹煌瑵舛鹊娜芤?、凝膠和糊劑，通過滴入、噴霧、涂布和灌注等方法將其應用到眼、口腔、鼻腔、喉、外耳道或尿道等黏膜處，產生麻醉。
浸潤麻醉和區(qū)域阻滯麻醉：沿手術切口線逐層注射局部麻醉藥或手術區(qū)周圍部位注射藥物，阻滯神經(jīng)纖維而達到麻醉作用，前者稱為浸潤麻醉，后者稱為區(qū)域麻醉。適用于犬、貓皮膚撕裂窗縫合、皮膚疣及皮膚腫瘤的切除、幼犬截尾術和皮膚活組織的采集等。
【注】：局麻一般采用浸潤麻醉方法，操作時，動物固定好后，首先在局部皮膚用皮頭針先作皮內注射，形成橘皮樣丘疹，然后換成局部麻醉長針頭，由皮點進針，放射到皮點周圍繼續(xù)注射，直到要求麻醉區(qū)域的皮膚都浸潤為止；可以根據(jù)實驗操作要求的深度按照皮下、筋膜、肌肉、腹膜或骨膜的順序，依次注射麻藥，以達到麻醉神經(jīng)末梢的目的。
局部麻醉雖然在動物實驗中用途不是很廣泛，但貓、犬等大動物在短時間的實驗中可能會使用局部麻醉的方法。
注意事項
在動物手術過程中，如果臟器長時間暴露，應適當?shù)渭訙匦缘纳睇}水，防止黏膜發(fā)干。
眼部周圍可以涂抹潤滑的眼膏，減少由于眼部干燥造成損傷。
麻醉后小鼠體溫調節(jié)機能被抑制，出現(xiàn)體溫下降。此時，常需要采取保暖措施，例如恒溫加熱毯、暖照燈等。還要注意每過10min左右翻身，防止血液沉積或肺葉的塌陷。
注意觀察小鼠的心率、呼吸頻率、眼球/尾部/耳朵的血管充盈程度等。
術后應提供無菌的籠具和舒適飼養(yǎng)環(huán)境，若術部的牽拉會阻礙小鼠飲水，應當在籠內放置無菌的果凍及輻照后的飼料供其食用。
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