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美鳳力臨床前大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心
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說到腫瘤藥物研發(fā)，大家首先聯(lián)想到是開始在“小白鼠”身上進(jìn)行的試驗(yàn)，然后再用到人身上。那么，在小白鼠體內(nèi)誘導(dǎo)生成的腫瘤，和人類的腫瘤是一模一樣的嗎？ 那么帶著這個(gè)問題，接下來讓我們一起來看看實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腫瘤體積的精確測量方法。首先，選擇合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接種腫瘤細(xì)胞。
在腫瘤學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常用的瘤株主要分為兩大類：鼠源瘤株與人源瘤株。鼠源瘤株可以生長在小鼠體內(nèi)，可直接在小鼠上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。而人源瘤株不能在正常小鼠體內(nèi)生長，需借助免疫缺陷小鼠（如裸鼠）作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以模擬人體環(huán)境。 然而，腫瘤的生長形態(tài)多樣，包括球形、橢圓形、長條形甚至不規(guī)則形狀，給測量腫瘤體積增加了難度。所以，在活體動(dòng)物中描述腫瘤大小往往為估算值。 二、具體的計(jì)算公式 對(duì)于離體移植瘤，最接近真實(shí)數(shù)據(jù)，具體測量方法是通過體外3D打印技術(shù)重現(xiàn)瘤體形態(tài)后，再采用排水法進(jìn)行測量，但這種方法的成本高且周期長，不適合頻繁測量腫瘤體積。 目前，針對(duì)動(dòng)物模型上的腫瘤體積測量，位于動(dòng)物體表的實(shí)體瘤大小直接使用游標(biāo)卡尺進(jìn)行測量。而對(duì)于位于體內(nèi)的實(shí)體瘤，可通過動(dòng)物活體熒光顯像、micro-CT（微型計(jì)算機(jī)斷層掃描）和MRI（磁共振成像）等方法進(jìn)行測量。也可通過安樂死動(dòng)物后進(jìn)行解剖尸檢，直接測量腫瘤尺寸，這種方法雖然具有破壞性，但能提供最為直接和準(zhǔn)確的體積數(shù)據(jù)。 上文提到，排水法測量得出的數(shù)據(jù)最接近真實(shí)體積。這一觀點(diǎn)在加利福尼亞大學(xué)洛杉磯分校醫(yī)學(xué)院的Mary M. Tomayko與C. Patrick Reynolds于1989年發(fā)表的論文中有提到。他們采用橢球體模型（公式為V=π/6×L[長徑]×W[短徑]×H[高]）計(jì)算所得的腫瘤體積，與通過排水法測量的體積最為接近，相關(guān)系數(shù)達(dá)到了r=0.93，充分證明了該計(jì)算方法在體積估算中的準(zhǔn)確性和可靠性。 在采用此方法測量前，首要要判斷腫瘤的長徑與短徑，確保測量時(shí)長短徑處于垂直方向。皮下腫瘤的測量，具體操作如下：使用游標(biāo)卡尺長度（L，尺寸最長的維度），寬度（W，尺寸較短的維度，垂直于長度所在平面，需確保測量時(shí)卡尺與動(dòng)物身體平面保持平行，高度（H，腫瘤上邊界至動(dòng)物身體表面之間的垂直距離）。通過上述三個(gè)維度的測量，可以為后續(xù)腫瘤體積的計(jì)算提供可靠數(shù)據(jù)。 在測量的過程中，腫瘤塊的長度L和寬度W可以很好地測量出來，但是腫瘤的高度由于另一側(cè)從皮膚長出，不太好測量。 在實(shí)際應(yīng)用中，因?yàn)棣?3.14，π/6=0.52，所以我們?cè)诓簧傺芯恐锌吹侥[瘤計(jì)算公式為V=0.52×L×W2，也有實(shí)驗(yàn)室用較為簡化的公式：V=(W2×L)/2。 減少操作員差異：不同人使用同一游標(biāo)卡尺進(jìn)行測量時(shí)，可能會(huì)有2mm的誤差，建議在整個(gè)測量過程中由同一位操作員完成，以減少誤差。 統(tǒng)一測量基準(zhǔn)：同一位測量者，如果每次選取的腫瘤長度和寬度的不一致，也會(huì)有誤差。建議在每次測量時(shí)都選擇相同位置測量，確保測量的一致性和準(zhǔn)確性。 原位與轉(zhuǎn)移腫瘤模型的特殊性：上述提到的腫瘤體積計(jì)算公式主要適用于體表或易于直接測量的腫瘤。對(duì)于體內(nèi)原位或轉(zhuǎn)移腫瘤模型，由于直接測量困難，通常采取分期分批安樂死動(dòng)物的方式，取出瘤體后進(jìn)行測量。以至于每次實(shí)驗(yàn)需要消耗大量的動(dòng)物以便在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行比較。
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