目的 建立干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白 3 基因(Ifitm3)敲除小鼠模型,探究 Ifitm3 對小鼠神經(jīng)干細(xì)胞增殖 和分化的影響。
方法 利用 CRISPR/ Cas9 技術(shù),建立 Ifitm3 敲除小鼠模型,通過基因型鑒定和 Western Blot 檢測 IFITM3 的敲除效果;利用蘇木素?伊紅(HE)染色和流式細(xì)胞術(shù)等方法分析 Ifitm3 敲除小鼠和野生型小鼠的表型差 異。 分離并培養(yǎng)野生型和 Ifitm3 敲除小鼠成體神經(jīng)干細(xì)胞,統(tǒng)計神經(jīng)球數(shù)量和大小,qRT?PCR、Western Blot、免疫熒 光技術(shù)檢測神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化的能力。
結(jié)果 成功建立 Ifitm3 敲除小鼠模型,Ifitm3 敲除小鼠發(fā)育正常,組織 病理學(xué)及免疫系統(tǒng)未見明顯異常。 體外實驗顯示 Ifitm3 敲除抑制小鼠神經(jīng)干細(xì)胞的自我更新潛能,導(dǎo)致神經(jīng)干細(xì) 胞增殖能力下降,并且抑制神經(jīng)干細(xì)胞向未成熟神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞分化。
結(jié)論 IFITM3 缺失導(dǎo)致神經(jīng)干細(xì)胞 增殖和分化能力下降,IFITM3 可能參與了神經(jīng)干細(xì)胞的功能調(diào)節(jié)。
閱讀原文:Ifitm3敲除抑制小鼠神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化.pdf