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美鳳力臨床前大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心
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實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎（experimental allergic encephalomyelitis，EAE）是由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的發(fā)生于易感動(dòng)物的自身免疫病，主要特征為中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）血管周圍單個(gè)核細(xì)胞浸潤和白質(zhì)脫髓鞘，其病理變化與多發(fā)性硬化（multiple sclerosis，MS）類似。 由于MS樣本不易獲取，因此EAE動(dòng)物模型是研究MS病理過程、發(fā)病機(jī)制的重要工具，在臨床神經(jīng)免疫學(xué)的研究中具有重要意義。 EAE小鼠模型 MOG35-55（髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白）誘導(dǎo)的EAE模型是一種廣泛使用的動(dòng)物模型，用于MS等中樞神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病與評(píng)估相應(yīng)的藥物藥效。在這個(gè)模型中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通過注射髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白來誘導(dǎo)產(chǎn)生EAE，這些蛋白片段模擬了MS中認(rèn)為的自身抗原。 構(gòu)建MOG誘導(dǎo)的EAE模型并利用其進(jìn)行藥效評(píng)估通常涉及以下步驟： 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選取：選擇合適的品系，通常是易感于EAE的近交系，如C57BL/6小鼠。 2、免疫誘導(dǎo)：將MOG與佐劑（如完全弗氏佐劑，CFA）混合后，注射到動(dòng)物體內(nèi)。還會(huì)添加PTX（Pertussis Toxin）等輔助成分以增強(qiáng)免疫反應(yīng)。 3、臨床評(píng)分：在注射抗原后，定期對(duì)動(dòng)物進(jìn)行臨床評(píng)分，監(jiān)測(cè)其行為和運(yùn)動(dòng)障礙。評(píng)分系統(tǒng)通常包括對(duì)癱瘓嚴(yán)重程度的評(píng)估。 4、組織學(xué)評(píng)估：在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，通過組織學(xué)方法（如HE染色、LFB染色）檢查動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥和脫髓鞘情況。 5、分子生物學(xué)分析：利用RT-qPCR等技術(shù)檢測(cè)相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)水平，了解免疫反應(yīng)的分子機(jī)制。 6、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以確定MOG誘導(dǎo)的EAE模型的可靠性和有效性。 7、治療干預(yù)實(shí)驗(yàn)：在模型建立后，可進(jìn)行各種治療策略的測(cè)試，如免疫調(diào)節(jié)藥物、抗炎治療等，以評(píng)估治療效果。 南模生物現(xiàn)推出EAE小鼠造模服務(wù)，部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 按照標(biāo)準(zhǔn)方案使用MOG誘導(dǎo)，小鼠在致敏后7-14天發(fā)病，表現(xiàn)出明顯的EAE癥狀，陽性藥芬戈莫德在該模型中表現(xiàn)出良好的治療效果。 Fig1. MOG誘導(dǎo)方案 Fig2. MOG誘導(dǎo)EAE模型的體重變化及臨床評(píng)分 Fig3. MOG誘導(dǎo)EAE模型典型病理染色結(jié)果及組織學(xué)評(píng)分 Fig4. MOG誘導(dǎo)EAE模型中脫髓鞘的病理染色結(jié)果及LFB評(píng)分 Fig5. MOG誘導(dǎo)EAE模型脊髓中mIL17和mIL1β的表達(dá)情況
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