原發(fā)性肝癌,是我國高發(fā)的,危害極大的惡性腫瘤。世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)發(fā)布的2020年最新全球癌癥負(fù)擔(dān)數(shù)據(jù)顯示,肝癌新發(fā)病例數(shù)41萬例,位居第5位,但是肝癌死亡病例數(shù)卻高居第二位。原發(fā)性肝癌的病因及確切分子機(jī)制尚不完全清楚,目前認(rèn)為其發(fā)病是多因素、多步驟的復(fù)雜過程,受環(huán)境和飲食雙重因素影響。流行病學(xué)及實(shí)驗(yàn)研究資料表明,乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染、黃曲霉素、飲水污染、酒精、肝硬化、性激素、亞硝胺類物質(zhì)、微量元素等都與肝癌發(fā)病相關(guān)。
由于原發(fā)性肝癌早期缺乏明顯的特異癥狀,常規(guī)的放療和化療的治療效果無明顯效果,肝臟病變部位切除是治療的重要途徑。如何有效地發(fā)掘肝臟再生潛能是術(shù)后病人得以存活的關(guān)鍵,因此,對肝臟的再生機(jī)理進(jìn)行研究對于肝臟疾病的治療具有重要的理論意義和臨床應(yīng)用價值。
2/3肝切除誘導(dǎo)的肝再生動物模型,最早是1931年由Higgins和Anderson在大鼠中使用,他們切除了大鼠四葉肝臟中的兩葉(約占整個肝臟的2/3),用于研究肝臟再生。在后續(xù)的研究中因?yàn)榇笫蟛僮飨鄬Ψ奖?,所以大多?shù)人選擇大鼠進(jìn)行肝再生的研究。2003年時Greene和Puder為開發(fā)了一種新穎、快速且安全的小鼠部分肝切除技術(shù),他們確定了小鼠肝臟七個葉的相對貢獻(xiàn),并切出來左前葉、左后葉和右前葉切除,大約占總肝臟體積的68%。同時作者還將手術(shù)的麻醉方法改為異氟烷氣體麻醉代替?zhèn)鹘y(tǒng)的三溴乙醇、氯胺酮和戊巴比妥,并把小鼠放在加熱墊上防止小鼠體溫流失,從而減少小鼠因手術(shù)引起的死亡。隨后小鼠2/3肝切除技術(shù)逐漸成熟。其中,2008年時 Claudia Mitchell 和 Holger Willenbring對小鼠2/3肝切除手術(shù)進(jìn)行了進(jìn)一步的改進(jìn):作者在進(jìn)行肝葉切除時,將三步改成兩步,首先切除小鼠肝臟的左后葉,再將小鼠的中間葉(左前葉和右前葉)一起切除,這種手術(shù)方法會將小鼠膽囊摘除。2014年時該課題組對小鼠的鎮(zhèn)痛、麻醉劑的選擇及體溫的控制也給出了如下補(bǔ)充:(1)為了防止麻醉下的小鼠體溫過低,在整個手術(shù)過程中將小鼠放在暖墊上。(2)術(shù)后關(guān)閉腹膜后,在關(guān)閉皮膚前,將0.25% (wt/vol)鹽酸布比卡因溶液(最大劑量8 mg/kg)滴于切口處。(3)術(shù)后使用鹽酸丁丙諾啡0.1 mg/kg維持鎮(zhèn)痛,之后每8-12小時注射一次,直到術(shù)后第2天結(jié)束。后續(xù)關(guān)于小鼠肝再生模型的構(gòu)建多采用以上兩種方法。
中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物研究所龔佳男課題組根據(jù)2008年Claudia Mitchell 和 Holger Willenbring報(bào)道的2/3肝切除誘導(dǎo)的小鼠肝再生的方法及2014年報(bào)道的改進(jìn)方法掌握了2/3肝切除誘導(dǎo)小鼠肝再生的手術(shù)操作,并且結(jié)果具有高度可重復(fù)性,為研究肝臟再生提供了有效的模型支撐。
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