在生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)中,為區(qū)別動物的不同個(gè)體或不同組別,需采用相應(yīng)的動物標(biāo)識方法,理想的標(biāo)識方法必須符合標(biāo)記明確易辨認(rèn),對動物損傷小且操作簡單的基本原則,可能的情況下盡量不采取將標(biāo)記做在動物身上的方法。群養(yǎng)的動物可以按其特有毛色、花紋進(jìn)行識別,如猴、犬常通過照片和文字記錄其外表和毛色特征,單籠飼養(yǎng)的動物可在籠上掛牌標(biāo)注。當(dāng)這些方法不能滿足實(shí)驗(yàn)要求時(shí),可采用以下方法對動物進(jìn)行標(biāo)記。
一、非損傷性標(biāo)識技術(shù)
(一)染色法
染色標(biāo)識是用化學(xué)染色劑在動物體表明顯部位涂染的方法,操作簡便,對動物損傷小,是實(shí)驗(yàn)室最常用的方法,適用于白色或淺色的動物,尤其適合小動物,白色或者淺色無花紋的小鼠、大鼠、豚鼠、兔均可采用。由于染色標(biāo)記可自行褪色,長期實(shí)驗(yàn)中需要定期復(fù)染。染色標(biāo)記也可因?yàn)閯游镩g的摩擦、舔毛、尿液或水浸漬、被毛脫落等原因而破壞,因此需要經(jīng)常檢查,及時(shí)復(fù)染。此外,需注意動物會試圖舔干被染的被毛,因此攝入少量染色液,可能對動物的健康和實(shí)驗(yàn)觀察有潛在影響,如可以看到攝入苦味酸的小鼠血清顏色變深。
1.標(biāo)識規(guī)則 10以內(nèi)的編號可使用一種染色液在不同部位涂染,100以內(nèi)的編號需使用兩種不同顏色的染色液進(jìn)行涂染,一種顏色代表十位數(shù),另一種顏色代表個(gè)位數(shù)。涂染規(guī)則如圖3-1-40所示。

2.染色操作 用毛筆(或以鑷子裹上棉花代替)蘸取適量染色液,逆毛涂刷。由于動物被毛生長有一定方向,逆毛涂刷可將被毛從毛根至毛尖全部染色,順毛時(shí)僅在毛尖染色且染色液容易到處流淌。染色后待被毛稍干再放開動物。
如無染色液,也可用油性記號筆進(jìn)行臨時(shí)性標(biāo)記,大鼠和小鼠可在尾部用不同的比劃代表數(shù)字(圖3-1-41),該標(biāo)記僅維持2~3天。兔和豚鼠可在耳部皮膚直接書寫編號。

3.常用染色液 3%~5%苦味酸溶液,涂染成黃色;將苦味酸溶于無水乙醇制成飽和苦味酸乙醇溶液,乙醇易揮發(fā),染色時(shí)可避免染色液流淌。
2%硝酸銀溶液,涂染成咖啡色,涂后需光照10分鐘。
0.5%中性紅或品紅溶液,涂染成紅色。
煤焦油乙醇溶液,涂染成黑色。
龍膽紫溶液,涂染成紫色。
(二)剪毛法
剪毛標(biāo)識是在動物體表相應(yīng)部位剪去被毛的標(biāo)識方法,操作簡便,不損傷動物,標(biāo)記也容易辨識。但由于動物的被毛不斷長出而使標(biāo)記逐漸消失,因此只適合短期研究。小鼠、大鼠、豚鼠之類的小型嚙齒類可按單色涂染標(biāo)記的規(guī)則剪毛,犬、兔等大、中型動物還可用剪毛刀在動物體側(cè)或背部剪出號碼。
(三)掛牌法
掛牌標(biāo)識是讓動物佩戴印有編號的號牌進(jìn)行標(biāo)識的方法,號牌法不受動物毛色的影響,但多用于體型較大和佩戴項(xiàng)圈的實(shí)驗(yàn)動物如犬、兔等。可將號碼牌固定在動物的項(xiàng)圈上,或者干脆在頸圈上印編號。號牌材質(zhì)可為塑料、金屬(不銹鋼或者鋁質(zhì))等,應(yīng)不生銹且不易損壞。禽類的編號可以采用掛腿圈法,首先將號碼沖壓在圓形或方形金屬牌上,金屬牌常用不生銹的鋁板制成,或者可使用市售的打好號碼和記號的鋁制牌。然后將金屬薄片固定在拴腿的皮帶圈上,將此圈固定在動物的腿的上部。
二、損傷性標(biāo)識技術(shù)
(一)耳標(biāo)法
耳標(biāo)即在動物的耳郭上所做的個(gè)體標(biāo)識,其中耳孔標(biāo)識是用專用的耳部打孔機(jī)在動物耳部打孔的標(biāo)識方法,耳缺標(biāo)識是用剪刀在耳緣剪出缺口的標(biāo)識方法,動物的編號由耳孔或者耳缺的位置和數(shù)量來表示。該方法所作標(biāo)記可終身保持,清晰且容易辨認(rèn),不受動物毛色的限制,但操作時(shí)會引起動物的疼痛以及造成一定程度的損傷,也可能會影響耳靜脈注射之類的實(shí)驗(yàn)操作。由于小鼠耳殼大而薄,容易操作,打孔或者剪耳后幾乎不出血,且很少在其耳上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,故該方法常用于黑色、棕色小鼠以及裸鼠等不能使用剪毛或者染色進(jìn)行標(biāo)記的小鼠。豬體表被毛稀疏,不能采用染色和剪毛,也常用此法進(jìn)行標(biāo)識。耳孔或耳缺標(biāo)記的缺點(diǎn)是不易記憶,不夠直觀。
1.標(biāo)識規(guī)則 可參考圖3-1-42,也可按照實(shí)驗(yàn)實(shí)際情況在表3-1-12的基礎(chǔ)上進(jìn)行變通。

2.標(biāo)記操作 見圖3-1-43。打孔或剪耳時(shí)可適當(dāng)進(jìn)行局部麻醉以減輕對動物的刺激,做好標(biāo)記部位的消毒和止血,將滑石粉涂抹在傷口上可防止傷口愈合標(biāo)記消失。

此外,對于體型較小的動物如嚙齒類,有時(shí)也將號牌懸掛在耳上,如圖3-1-44。掛號牌的過程視方法的不同而對動物產(chǎn)生不同程度的損傷,且動物可能因不適而設(shè)法自行去除號牌,耳部懸掛標(biāo)簽也可能妨礙動物的日常活動與交流。

(二)刺染法
刺染(tattoo)標(biāo)識是在表皮針刺后涂以顏料,使其滲入皮下形成永久的記號,根據(jù)使用工具和操作方法的不同又稱為刺號、刺青、打號、刺印、針刺等。刺染適用于各種毛色的動物,并且能夠用于幼齡小鼠標(biāo)記而取代剪趾法。
1.標(biāo)記部位 大鼠、小鼠和豚鼠等小動物,可在尾部、耳部或四肢皮膚裸露處進(jìn)行標(biāo)記,僅刺出記號即可,兔和耳朵比較大的犬可在耳部標(biāo)記,可以使用刺號鉗刺出號碼再染色,猴可在胸部裸露皮膚處標(biāo)記。
2.標(biāo)記操作 見圖3-1-45和圖3-1-46。針刺時(shí)應(yīng)避開大血管,預(yù)先對皮膚消毒,將表皮刺出血即可,不能刺入太深,刺后將染料涂抹于表皮,待染料滲入后再擦干凈皮膚。


(三)剪趾法
剪趾標(biāo)識是剪去動物特定腳趾第一趾節(jié),使之形成永久缺失而成為個(gè)體標(biāo)志(圖3-1-47)。由于剪趾對動物福利影響較大,故非不得已不推薦使用,且只限于初生或幼齡動物。剪趾法目前多用于轉(zhuǎn)基因小鼠的個(gè)體識別,因轉(zhuǎn)基因小鼠在出生后需逐個(gè)進(jìn)行基因型鑒定,但此時(shí)被毛尚未長出,耳殼也不夠大,不能進(jìn)行染色標(biāo)記和耳孔/耳缺標(biāo)記。對小鼠剪趾應(yīng)在14日齡以內(nèi)進(jìn)行,在1周齡內(nèi)剪趾無需麻醉,但出生第2周實(shí)施應(yīng)進(jìn)行麻醉。剪趾可以在不同毛色小鼠進(jìn)行,如剪趾得當(dāng),標(biāo)記可留存終身。剪趾時(shí)需合理掌握腳趾剪去的程度,剪趾過少,腳趾愈合后標(biāo)記不易辨認(rèn),剪趾過多則容易使動物失血過多。剪趾標(biāo)記的同時(shí),可以將剪下的腳趾用于基因型鑒定,從而不用再從尾尖切取組織,減少了對動物的損傷。剪趾后應(yīng)注意止血。

(四)電子芯片法
電子芯片法是在動物皮下埋植電子芯片進(jìn)行永久標(biāo)識的方法(圖3-1-48)。每個(gè)微芯片具有獨(dú)一無二的編號,工作人員通過專用的便攜式微芯片掃描儀讀出芯片上的信息進(jìn)行識別,由于微芯片可以攜帶大量信息,可以將該動物的有關(guān)信息如來源、遺傳背景、出生日期等都載入芯片。目前芯片法由于成本較高而尚未普及,僅用于獼猴等價(jià)值高的實(shí)驗(yàn)動物。
